Zbornik radova

2.2.4.1. Бојење по Грам-у За бојење микроорганизама по Грам-у корнсте се: кристал виолет,Луголов раствор, 96% етанол, дестнлована вода и 0,25% сафранин 2.2.4. Бојење по Шефер-Фултон-у За бојење микроорганизама по Шефер-Фултон-у користе се: малахит зелено, 0,5% сафранин и дестилована вода 2.2.5. Бактерполошке анализе 2.2.5.1. Одређивање укупног броја мезофилних аеробних бактерија у Iмл узорка По 0,1 мл узорка се утрљава стакленим штапићем у ЈТА подлогу, у дупликату, и ставља на инкубацију 24 h на 37С. Након инкубације пребројавају се нзрасле колоније у обе петри-шоље и израчунава се средња вредност (Симић н Кнежевић, 1984). 2.2.5.2. Одређивање укупног броја хетеротрофних бактеријау 1 мл узорка Укупан број хетеротрофних бактерија у 1 мл узорка одређује се истом методом као и укупан број мезофилних аеробних бактерија у 1 мл узорка, али се као хранљива подлога користи МПА. 2.2.5.3. Одређивање укупногброја олиготрофних бактерија у 1 мл узорка Укупан број олиготрофних бактерија у 1 мл узорка одређује се истом методом као и укупан број мезофилнмх аеробних бактерија у 1 мл узорка, али се као хранљива подлога користи МПА у разблажењу 1:10. 2.2.5.4. Одређивање највероватнијег броја (МПН) колиформних бактерија у 1 л узорка а) Претходни тест МПН колиформних бактерија одређује се методом колиметрије: засејава се sxl мл, Ixo.l мл и Ixo.ol мл узорка у епрувете у којима се налази по 5 мл ЛАП и Дурхамова епрувета; инкубација на37С у термостату траје 2448 h након чега сеочитавају резултати наоснову којихсе, помоћу Swaroop-ove таблнце одређује МПН колиформних бактерија у 1 л узорка. б) Потврдни тест Садржај карактеристичне позитивне колиметријске епрувете (епрувета у којој је дошло до промене боје подлоге у интензивније црвено и до појаве гаса у Дурхамовој епруветм) пресејава се на Ендо агар методом ишаране плоче и инкубнра се 24 h на 37С. Након инкубације пикирају се израсле колоније и праве микроскопски препарати. ц) Завшни тест Узорак се засејава на СЦА подлогу у Петри шоље методом ишаране плоче нли у епрувете на косн агар са истом подлогом. Инкубирање на 37С траје четири дана након чега се очитавају резултати. 2.2.5.5. Утврђнвање присуства и броја Prutcus sp. у узорку Садржај колиметријских епрувета засејава се на ФАА у Петри шоље издељене на осам једнакнх делова. У сваку комору се у виду праве линије

56