JUS standardizacija
6.2 6.21 6.211
6.212
6.21 6.211
6,212 6.212.1
6.212.2 6.212.3 6.212.4 6.212.5
6.213
Metode ispitivanja
Određivanje vlage
·Definicija
Sadržaj vlage u preparatu jc gubitak mase ispitivanog uzorka sušenjem na 105 + 2"C. Postupak ı
1—2 g uzorka stavi se u stakleni sud za merenje kome je prethodno određena masa i suši u sušnici na 105 + 2“C u toku 2 sata. Sud se ohladi u eksikatoru i zatvoren meri. Sušenje se produžava do konstantne mase. Smatra se da je postignuta konstantna masa kad se dva uzastopna merenja razlikuju najviše za 5 mg.
Izračunavanje rezultata L Iz gubitka mase uzorka sušenjem izračuna se sadržaj vlage na sledeći način:
100 (a—b) a
“% Vlage =
gde je: a — masa uzorka prce sušenja, b = masa uzorka posle sušenja.
Određivanje encimatske vrednosti u LV (Lohlein—Volhard) jedinicama.
Princip određivanja
Određivanje encimatske vrednosti vrši se na osnovu delovanja sredstava za nagrizanje na alkalni rastvor kazeina. Proces nagrizanja (razlaganja kazeina) se posle 1 sata prekine dodavanjem hlorovodonične kiseline. Dodavanjem natrijumsulfata taloži se nerazloženi kazein, koji vezuje određenu količinu kiseline. Istaloženi kazein se filtrovanjem ukloni iz rastvora. Što je više kazeina razloženo, tj. postalo netaloživo, to će u filtratu biti više kiseline i razloženih produkata kazeina. Utrošak alkalriog rastvora za retitraciju kiseline služi kao direktno merilo fermentativnog delovanja, tj. encimatske vrednosti preparata za nagrizanje.
Potrebne hemikalije
5% rastvor kazeina. 50 g originalnog Hamartsten (Merck)-kazeina se sipa u erlenmajer od | |] i uz mućkanje polako dodaje 250 ml destilisane vode. Mućkanje se produžava dok ne nastane jednolična kaša. Prethodnoj kaši dodaje se 50 ml 1 n Na OH i zagreva pažljivo na vodenom kupatilu, dok se kazein potpuno ne rastvori. Rastvor se sada kvantitativno prenese u odmernu tikvicu od 1 li destilisanom vodom dopuni gotovo do marke (50 ml manje). Pripremljen rastvor mora imati pH = 8,2 (pH rastvora se proverava pomoću pH-metra). Ako pH.rastvora nije 8,2 onda se mora korigovati. Ako je pH-vrednost manja od 8,2 dodaje se kap po kap 0,1 n Na OH dok se ne postigne pH 8,2 posle čega se odmerna tikvica napuni do oznake i dobro promeša. Ako je pH veći od 8,2 rastvor se mora ponovo pripremiti, Odmerna tikvica se posle postizanja pH 8,2 dopuni destilisanom vodom do oznake. Da bi se postojanost alkalnog rastvora produžila rastvor se konzerviše dodavanjem nekoliko kapi toluola. –
o
20% rastvor natrijumsulfata 0,2 n hlorovodonična kiselina. i ie 0,1 n natrijumhidroksida.
Indikator bromtimolplavo (bromtimolblau): 0,040 g bromtimolplavog se rastvara u 20% alkoholu (20 g 100% alkohola i 80 g destilisane vode).
Postupak Za određivanje encimatske vrednosti preparata čija jačina nije poznata odmere se sve navedene količine u tabeli 1, dok se za preparat poznate encimatske vrednosti odabere interval u kome treba da Je jačina sredstva za nagrizanje.
Tabela 1
Odmerena količina prepa-
Jačina preparata rata za analizu, u g
|
|
2.500 e. j. LV | 0,06 + 0,0001 |
1750 e LN LJU 0,12 + 0,0001 |
| 1.000 e. j. LV 0,18 + 0,0001 | 500 e,j. LV 0,40 + 0,000! | 200 e. j. LV 0,60 + 0,000! |